fa بررسی الگوی متیلاسیون و بیان ژن APC به دنبال تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان به رده استئوبلاستی مدیریت خدمات بهداشتی درمانی Hospital Managment پژوهشی اصيل Original Research <p dir="RTL" style="text-align: justify; margin-right: -0.35pt;"><strong>زمینه و هدف:</strong> فرایندهای مختلفی روی تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی(<span dir="LTR">MSC</span>) به سلول های استئوبلاستی تاثیر می‌گذارند که در این میان، مسیر پیام رسان <span dir="LTR">Wnt</span> حائز اهمیت ویژه ای است. در این مسیر پیام رسان، مولکول <span dir="LTR">APC</span> به عنوان کنترل کننده منفی <span dir="LTR">Wnt</span> عمل می کند که با اتصال به <span dir="LTR">&beta;-catenin</span> سبب تجزیه این مولکول می گردد. لذا در این تحقیق به تخمین ارتباط متیلاسیون <span dir="LTR">DNA</span> با بیان ژن(<span dir="LTR">APC</span> یا <span dir="LTR">Adenomatous Polyposis Coli</span>) طی تمایز استئوبلاستی پرداخته شد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify; margin-right: -0.35pt;"><strong>روش بررسی:</strong> در این مطالعه ی تجربی، پس از جدا سازی و تکثیر <span dir="LTR">MSCs</span>، القای تمایز استئوبلاستی صورت گرفت. به منظور تایید تمایز استئوبلاستی از رنگ آمیزی آلیزارین رد و بیان شاخص های تمایزی شامل آلکالین فسفاتاز(<span dir="LTR">ALP</span>) و استئوکلسین استفاده گردید. وضعیت متیلاسیون ژن<span dir="LTR">APC </span>&nbsp;با روش(<span dir="LTR">MSP</span> یا <span dir="LTR">Methylation-Specific PCR</span>)، وضعیت بیان ژن <span dir="LTR">APC</span> با استفاده از <span dir="LTR">Real time PCR</span> در روزهای مختلف تمایزی ارزیابی شد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify; margin-right: -0.35pt;"><strong>یافته‌ها: </strong>نتایج به دست آمده از رنگ آمیزی آلیزارین رد و بیان شاخص های <span dir="LTR">ALP</span> و استئوکلسین تایید کننده تمایز استئوبلاستی بود. نتایج حاکی از کاهش معنی دار بیان ژن <span dir="LTR">APC</span> در روز 7 تمایز استئوبلاستی بود(0/05<span dir="LTR">P<</span>). همچنین نتایج نشان دهنده ی هایپرمتیلاسیون پروموتر ژن <span dir="LTR">APC</span> طی تمایز استئوبلاستی بود.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify; margin-right: -0.35pt;"><strong>نتیجه‌گیری:</strong> کاهش بیان ژن <span dir="LTR">APC</span> می تواند در کنترل مسیر سیگنالی <span dir="LTR">Wnt</span> طی تمایز <span dir="LTR">MSC</span> مشتق از مغز استخوان به رده استئوبلاستی در مراحل مختلف نقش موثری ایفا کند. همچنین با توجه به نتایج به دست آمده، متیلاسیون پروموتر ژن <span dir="LTR">APC</span> نقش مهمی در کنترل بیان این ژن به عهده دارد.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Background and Aim:</strong> Different regulation processes have an effect on osteoblastic differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs), and among them Wnt signaling pathway is particularly desirable. In Wnt signaling pathway, Adenomatous Polyposis Coli (APC) bind to &beta;-catenin and induce its degradation, thereby acting as a negative regulator of canonical Wnt pathway. In this study, gene expression and DNA methylation of APC gene during osteoblastic differentiation were determined.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Materials and Methods:</strong> In this experimental study, after the isolation of MSCs, the induction of osteoblastic differentiation was done. To confirm osteoblastic differentiation, alizarin red staining together with the expression of Alkaline Phosphatase (ALP) and osteocalcin as specific osteoblastic markers was performed. APC gene methylation status by MSP (Methylation Specific PCR) and gene expression status of APC gene using Real-Time PCR technique during different times were evaluated.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Results: </strong>The results of alizarin red staining and the expression of ALP and osteocalcin confirmed osteoblastic differentiation. In addition, the results showed a significant decrease in the expression of APC gene on the 7^th day of osteoblastic differentiation (P<0.05). Also, the results revealed hypermethylation status of APC gene promoter during osteoblastic differentiation.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Conclusion: </strong>It seems that the decreased expression APC gene will play an important role in Wnt signaling pathway regulation in different stages during osteoblastic differentiation of bone marrow-derived MSC. Also, according to the results, APC gene promoter methylation will play an important role in controlling gene expression.</p> تمایز استئوبلاستی, ژن APC, متیلاسیون Osteoblastic Differentiation, APC Gene, Methylation 541 555 http://payavard.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-149&slc_lang=fa&sid=1 Raja Al-Huthaifi رجاء الحذیفی No Master of Science in Hematology, Hematology Department, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran کارشناس ارشد هماتولوژی، گروه هماتولوژی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Ali Dehghanifard علی دهقانی فرد No Ph.D Student in Laboratory Hematology & Blood Bank, Sarem Cell Research Center- SCRC, Sarem Women’s Hospital, Tehran, Iran دانشجوی دکتری تخصصی هماتولوژی آزمایشگاهی و بانک خون، مرکز تحقیقات سلولی-مولکولی و سلول‌های بنیادی صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، تهران، ایران Saeid Kaviani سعید کاویانی kavianis@modares.ac.ir Yes Associate Professor, Hematology Department, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشیار، گروه هماتولوژی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Mehrdad Noruzinia مهرداد نوروزی نیا No Associate Professor, Medical Genetics Department, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشیار، گروه ژنتیک پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Samira Rezaei سمیرا رضایی No Master of Science in Genetics, Sarem Cell Research Center- SCRC, Sarem Women’s Hospital, Tehran, Iran کارشناس ارشد ژنتیک، مرکز تحقیقات سلولی-مولکولی و سلول‌های بنیادی صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، تهران، ایران Mehdi Azad مهدی آزاد No Assistant Professor, Medical Laboratory Sciences Department, School of Allied Medicine, Qazvin University of Medical Sciences, Qazvin, Iran استادیار، گروه علوم آزمایشگاهی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، قزوین، ایران Maedeh Mashhadikhan مائده مشهدی خان No Ph.D in Developmental Biology, Sarem Cell Research Center- SCRC, Sarem Women’s Hospital, Tehran, Iran دکتری تخصصی زیست شناسی تکوین، مرکز تحقیقات سلولی-مولکولی و سلول‌های بنیادی صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، تهران، ایران Saeid Solali سعید سلالی No Assistant Professor in Laboratory Hematology & Blood Bank, Hematology and Oncology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran استادیار هماتولوژی آزمایشگاهی و بانک خون، مرکز تحقیقات هماتولوژی و انکولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران