fa تشخیص و تعیین ژنوتایپ گونه‌های لیشمانیای جلدی در جنوب شرق ایران: آنالیز هضم آنزیمی (RFLP) <p dir="rtl" style="text-align: justify"><!--stripped--> Normal 0 false false false EN-GB X-NONE AR-SA MicrosoftInternetExplorer4 <!--stripped--><!--stripped--> <!--stripped--> <!--stripped--> <style> /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable {mso-style-name:"Table Normal" mso-tstyle-rowband-size:0 mso-tstyle-colband-size:0 mso-style-noshow:yes mso-style-priority:99 mso-style-qformat:yes mso-style-parent:"" mso-padding-alt:0cm 5.4pt 0cm 5.4pt mso-para-margin:0cm mso-para-margin-bottom:.0001pt mso-pagination:widow-orphan font-size:11.0pt font-family:"Calibri","sans-serif" mso-ascii-font-family:Calibri mso-ascii-theme-font:minor-latin mso-fareast-font-family:"Times New Roman" mso-fareast-theme-font:minor-fareast mso-hansi-font-family:Calibri mso-hansi-theme-font:minor-latin mso-bidi-font-family:Arial mso-bidi-theme-font:minor-bidi} </style> <!--stripped--><strong>زمینه و هدف: </strong>لیشمانیوز جلدی بیماری زئونوزی بوده که عامل آن لیشمانیا ماژور و لیشمانیا تروپیکا می‌باشد. در این مطالعه به‌منظور تشخیص گونه‌های لیشمانیا در کانون‌های لیشمانیوز جلدی در جنوب شرق ایران از روش RFLP استفاده شده است. <br></p><p dir="rtl" style="text-align: justify"><strong>روش بررسی: </strong>بدین منظور تعداد 55 نمونه بالینی از بیماران مراجعه‌کننده به مراکز درمانی شهرستان بم و تعداد 28 نمونه از شیراز جمع‌آوری گردید. پس از نمونه‌گیری از محل ضایعه، خون و پوسته‌های زخم روی کاغذهای صافی واتمن قرار داده شد. پس از خشک شدن، نمونه‌ها به‌آزمایشگاه منتقل و تا زمان استخراج اسید نوکلئیک در دمای °^c4 نگهداری گردیدند. اسید نوکلئیک نمونه‌ها با استفاده از کیت استخراج DNA جدا و در °^c20- تا زمان انجام آزمایش نگهداری شد. ناحیه مشترک 400 جفت بازی در جنس لیشمانیا  ITS1با استفاده از پرایمرهای مشترک جنس لیشمانیا آمپلی فای شده و در ادامه با آنزیم HaeIII آمپلیکون هضم شده و الگوی شکسته شدن آنها در مقایسه با سوش‌های رفرانس مورد ارزیابی قرار گرفتند.<strong> <br></strong></p><p dir="rtl" style="text-align: justify"><strong></strong><strong>یافته‌ها:</strong> نتایج حاصله نشان داد که تمامی نمونه‌های اخذ شده از شهرستان بم گونه لیشمانیا تروپیکا و از نمونه‌های شیراز تنها یک نمونه لیشمانیا ماژور و بقیه تروپیکا تشخیص داده شد. این امر قابل تفسیر می‌باشد چرا که لیشمانیوز پوستی ایجاد شده توسط لیشمانیا تروپیکا ناشی از مخازن شهری انگل (سگ و سگ سانان) می‌باشد.<strong> <br></strong></p><p dir="rtl" style="text-align: justify"><strong>نتیجه‌گیری:</strong> نتایج به‌دست آمده با توجه به نوع زخم و تاریخچه بیماران که از مناطق شهری مراجعه نموده قابل تفسیر می‌باشد. ضمن آنکه روش RFLP تکنیکی با حساسیت و ویژگی بالا بوده و می‌تواند در یک روز کاری علاوه بر تشخیص لیشمانیوز، نوع گونه را مشخص نماید.</p> <p style="text-align: justify"><!--stripped--> Normal 0 false false false EN-GB X-NONE AR-SA MicrosoftInternetExplorer4 <!--stripped--><!--stripped--> <!--stripped--> <!--stripped--> <style> /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable {mso-style-name:"Table Normal" mso-tstyle-rowband-size:0 mso-tstyle-colband-size:0 mso-style-noshow:yes mso-style-priority:99 mso-style-qformat:yes mso-style-parent:"" mso-padding-alt:0cm 5.4pt 0cm 5.4pt mso-para-margin:0cm mso-para-margin-bottom:.0001pt mso-pagination:widow-orphan font-size:11.0pt font-family:"Calibri","sans-serif" mso-ascii-font-family:Calibri mso-ascii-theme-font:minor-latin mso-fareast-font-family:"Times New Roman" mso-fareast-theme-font:minor-fareast mso-hansi-font-family:Calibri mso-hansi-theme-font:minor-latin mso-bidi-font-family:Arial mso-bidi-theme-font:minor-bidi} </style> <!--stripped--> <strong>Background: </strong>Leishmaniasis is a parasitic infectious disease which causes skin sores. There is no effective laboratory screening tests for leishmaniasis. Some diagnostic techniques exist that allow parasite detection and species identification by special culture and microscopy, biochemical (Isoenzymes), immunologic (immunoassays), and molecular (PCR) approaches. Specific major objectives of this study was to genotyping of Leishmania species in Bam and Shiraz city.<br> <strong>Methods: </strong>A total of 83 samples of Leishmania were collected from patients clinically suspected of cutaneous leishmaniasis. The geographic distributions of the samples were 55 samples from Bam and 28 from Shiraz city. For this propose samples of skin and bloods were blotted on filter paper. Genomic DNA extracted with a Genomic DNA extraction kit (AccuPrep, BIONEER). Aliquots of extracted DNA were kept at -20°^C. region of ITS1 amplified with the published Leishmania-specific primers. 15-20mL of these amplicons, containing the amplified ITS1 region, was digested for 2h with HaeIII.<br><strong>Results: </strong>All 55 samples from Bam were considered as L. tropica and the positive samples from Shiraz considered as L. tropica and just one sample was L. major which was belonged to a patient had previously traveled to Isfahan and Khuzestan.<br> <strong>Conclusion: </strong>In the current study a PCR technique was employed for amplification of Leishmania DNA directly in biological materials. Characterization of genus of Leishmania using RFLP-PCR method is too sensitive and too rapid, and there is no need for culturing the parasite for diagnosis.</p> لیشمانیوز جلدی،RFLP،بم،شیراز Cutaneous leishmaniasis,RFLP,Bam,Shiraz 168 172 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-466&slc_lang=fa&sid=1 Khalili M محمد خلیلی Yes Nourollahi-fard SR سعید رضا نوراللهی فرد No