fa تمایز سلول‌های بنیادی اندومتر رحم به نورون حرکتی با استفاده از ریز‌مولکول پورمورفامین مقاله اصیل Original Article <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>زمینه و هدف:</strong> ریزمولکول پورمورفامین آگونیست پروتیین <span dir="LTR">Smoothened</span> در مسیر سیگنالینگ سونیک هچ‌هاگ &nbsp;<span dir="LTR">(Sonic hedgehog)</span> است. استفاده از سونیک هچ‌هاگ باعث پیشروی تمایز عصبی می‌شود و سلول‌های تمایز یافته، پروتیین‌های ویژه‌ی بافت عصبی را بیان می‌کنند. نوروفیلامنت و استیل کولین ترانسفراز، پروتیین‌های ویژه نورون‌های حرکتی هستند که بیان آن‌ها در سلول‌های در حال تمایز نشان‌دهنده تبدیل آن‌ها به نورون‌های حرکتی است. هدف از این مطالعه بررسی توانایی مولکول پورمورفامین در تمایز سلول‌های بنیادی اندومتریال به نورون حرکتی است.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>روش بررسی: </strong>در این مطالعه تحلیلی که در مهر ماه 1394 در دانشگاه علوم پزشکی تهران انجام گرفت، سلول‌های بنیادی به روش آنزیمی از بافت اندومتریوم رحم جداسازی شدند. پس از پاساژ سوم فلوسایتومتری برای مارکرهای مزانشیمی انجام شد. سپس سلول‌ها به دو گروه کنترل و تمایزی تقسیم شدند. در گروه تمایزی، سلول‌ها با محیط تمایزی حاوی پورمورفامین تیمار شدند. سپس تست ایمونوسیتوشیمی <span dir="LTR">(ICC)</span> و همچنین <span dir="LTR">Real-time PCR</span> برای بیان مارکرهای سلول‌های عصبی انجام شد.&nbsp;</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>یافته‌ها:</strong> آنالیز فلوسایتومتری نشان داد که سلول‌های بنیادی اندومتریال برای <span dir="LTR">CD90, CD105</span> و <span dir="LTR">CD146</span> مثبت و برای <span dir="LTR">CD31, CD34</span> منفی هستند. نتایج <span dir="LTR">ICC</span> و <span dir="LTR">Real-time PCR</span> نشان داد که سلول‌های تیمار شده با پورمورفامین، مارکرهای نورون‌های حرکتی نوروفیلامان و استیل کولین ترانسفراز را بیان می‌کنند.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>نتیجه‌گیری: </strong>بر اساس یافته‌های این پژوهش می‌توان نتیجه گرفت که ریزمولکول پورمورفامین با فعال نمودن مسیر سیگنالینگ سونیک هچ‌هاگ توانایی القای تمایز سلول‌های بنیادی به سلول‌های عصبی، به‌ویژه نورون‌های حرکتی را دارد.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Background: </strong>Small molecule Purmorphamin (PMA) is the agonist of smoothened protein in Sonic hedgehog (Shh) signaling pathway. Effect of purmorphamin small molecule on differentiation of mesenchymal cells into bone tissue has been studied previously. Use of Shh causes progression of neural differentiation, and the differentiated cells express specific neural markers. Neurofilament (NF) and acetylcholine esterase (Chat) are specific markers of motor neurons and their expression in differentiated cells indicates their conversion into motor neurons. The aim of this study was to evaluate the ability of PMA to differentiate the human endometrial stem cells (hEnSCs) into motor neurons.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Methods: </strong>This analytical study was done in Tehran University of Medical Sciences laboratory on September of 2015. In this study hEnSCs were enzymatically extracted from endometrial tissue. After third passages, the flow cytometry was done for mesenchymal stem cells markers. The mesenchymal stem cells were divided into control and differentiated groups. FBS 10%+DMEM/F12 was added to the culture medium of control group and the differentiating group was treated with differentiating medium containing N2, PMA, DMEM/F12, FBS, B27, IBMX, 2ME, FGF2, RA, BDNF. After 21 days immunocytochemistry (ICC) test was done for the expression of NF and Chat proteins and Real-time PCR analysis for expression of neural markers such as NF, Chat, Nestin and GFAP (as glial marker) at mRNA level.</p> <table align="center" cellpadding="0" cellspacing="0" hspace="0" vspace="0"> <tbody> <tr> <td align="left"> <p style="text-align: justify;"><strong>Results: </strong>The flow cytometry analysis showed that hEnSCs were positive for mesenchymal markers CD90, CD105 and CD146 and negative for endothelial marker CD31, and hematopoietic marker CD34. The immunocytochemistry and Real time-PCR results showed that the cells treated with PMA expressed motor neuron markers of NF and Chat.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Conclusion: </strong>According to the results of this study, it can be concluded that small molecule PMA has the potency to induce the differentiation of hEnSCs into neural cells, specifically motor neurons by activating Shh signaling pathway.</p> </td> </tr> </tbody> </table> <div style="clear: both; text-align: justify;"></div> تمایز, سلول‌های بنیادی اندومتریال, پورمورفامین, مسیر سونیک هچ‌هاگ differentiation, endometrial stem cells, purmorphamin, sonic hedgehog pathway 861 868 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-5544&slc_lang=fa&sid=1 Homa Mohseni Kouchesfahani هما محسنی کوچصفهانی kouchesfehani@yahoo.com Yes Department of Animal Biology, School of Biological Sciences, Kharazmi University, Tehran, Iran. گروه علوم جانوری، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران. Somayeh Ebrahimi-Barough سمیه ابراهیمی باروق No Department of Tissue Engineering and Applied Cell Sciences, School of Advance Technologies in Medicine, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه مهندسی بافت و علوم سلولی کاربردی، دانشکده فناوری‌های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران. Jafar Ai جعفر آی No Department of Tissue Engineering and Applied Cell Sciences, School of Advance Technologies in Medicine, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه مهندسی بافت و علوم سلولی کاربردی، دانشکده فناوری‌های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران. Azam Rahimi اعظم رحیمی No Department of Animal Biology, Cell & Developmental Biology, School of Biological Sciences, Kharazmi University, Tehran, Iran. گروه علوم جانوری، سلولی تکوینی جانوری، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران.