fa ارزیابی بیان پروتیین متصل به دُمین WW غلاف خلف آکروزومی در اسپرماتوزوآی مردان نابارور با واریکوسل مقاله اصیل Original Article <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:yekanyw;"><strong><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">پروتیین متصل به دُمین </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">WW</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> غلاف خلف آکروزومی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">(PAWP)</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> به‌عنوان یکی از فاکتورهای اسپرمی مرتبط با فعال‌سازی تخمک معرفی شده که در اسپرماتیدهای طویل شده، بیان می‌گردد. مطالعات پیشین نشان داده‌اند که افزایش دمای بیضه در مردان نابارور با واریکوسل می‌تواند روی کیفیت مایع منی، بیان ژن‌ها و پروتیین‌ها تاثیر گذارد. در این مطالعه، بیان </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">PAWP</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> در هر دو سطح </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">RNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> و پروتیین و همچنین آسیب </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> اسپرم بین مردان بارور و مردان نابارور با واریکوسل مقایسه شد.</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">روش بررسی: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">در این مطالعه مورد-شاهدی، نمونه‌های مایع منی از ۲۰ فرد بارور و ۳۵ نابارور با واریکوسل مراجعه کننده به مرکز باروری و ناباروری اصفهان از دی ۱۳۹۴ تا شهریور ۱۳۹۵ جمع‌آوری شده بود. پارامترهای اسپرمی، آسیب </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، بیان </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">PAWP</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> در هر دو سطح </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">RNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> و پروتیین به‌ترتیب بر اساس دستور کار سازمان بهداشت جهانی، تست کروماتین، واکنش زنجیره پلی‌مراز همزمان و تکنیک وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفت و داده‌ها مقایسه گردید.</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها:</span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">میانگین غلظت اسپرم، درصد تحرک و بیان </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">PAWP</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> در هر دو سطح </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">RNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> (۰/۰۰۱</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">P<</span></span><span style="font-size:10.0pt;">) و پروتیین (۰/۰۳</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">P=</span></span><span style="font-size:10.0pt;">) در افراد نابارور با واریکوسل در مقایسه با افراد بارور به‌طور معناداری پایین‌تر بود. همچنین میانگین درصد مورفولوژی غیرطبیعی اسپرم و آسیب </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> افراد نابارور با واریکوسل در مقایسه با افراد بارور به‌طور معناداری بیشتر بود</span> <span style="font-size:10.0pt;">(۰/۰۳</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">P=</span></span><span style="font-size:10.0pt;">).</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">بیان </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">PAWP</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> به‌عنوان پروتیینی که در فرآیند اسپرماتوژنز و لقاح نقش دارد، در افراد نابارور با واریکوسل کاهش یافت. همچنین سلامت </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> اسپرم در این افراد مختل شده که می‌توان به‌عنوان اتیولوژی‌های مهم ناباروری در نظر گرفت.</span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background: </strong>Post-acrosomal sheath WW domain binding protein (PAWP) is one of sperm factors related to oocyte activation and is expressed in elongating spermatid. Previously, the effect of high of testicular temperature in infertile men with varicocele on semen quality, sperm DNA damage, expression of genes and proteins were reported. In this study, expression of PAWP at RNA and protein levels, and also sperm DNA damage were compared between fertile and infertile men with varicocele.<br> <strong>Methods: </strong>In this case-control study, semen samples were collected from 35 infertile men with varicocele (grade II & III) and 20 fertile men referring to Isfahan Fertility and Infertility Center from January 2016 to September 2016. Ejaculated semen was obtained by masturbation into a sterile plastic container after 3-5 days of abstinence and was allowed to liquefy at room temperature. Briefly, sperm concentration, motility and morphology were evaluated using a sperm chamber (Sperm meter; Sperm Processor, Aurangabad, India), Computer Assisted Semen Analysis (CASA, Video Test, ltd: version Sperm 2.1, Russia) and Papanicolaou staining, respectively. In addition, DNA fragmentation, expression of PAWP at RNA and protein levels were assessed by real-time PCR, and Western blot technique, respectively. Microsoft Excel 2013 (Microsoft Corp., Redmond, WA, USA) and Package for the Social Studies were used to analyze data. We used independent-samples t-test to compare the mean value between different groups. Differences with values of P<0.05 were considered as statistically significant.<br> <strong>Results: </strong>Mean of semen volume, sperm concentration, percentage of sperm motility, and expression of PAWP at both RNA (P=0.0001) and protein (P=0.03) levels were significantly lower in infertile men with varicocele in comparison with fertile men. In addition, mean percentage of sperm abnormal morphology and sperm DNA fragmentation were significantly higher in infertile men with varicocele in comparison with fertile men (P<0.05).<br> <strong>Conclusion: </strong>Expression of PAWP as a protein involved in spermatogenesis and fertilization process, has decreased in infertile men with varicocele. In addition, sperm DNA integrity was disrupted in these individuals that can be considered as a main etiology of infertility. <div style="clear:both;"></div> </div> <div style="clear:both;"></div> مطالعه مورد-شاهد, واریکوسل, آسیب DNA, آنالیز مایع منی case-control studies, DNA fragmentation, PAWP, semen analysis, varicocele 417 423 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-5604&slc_lang=fa&sid=1 Nasim Ghazavi-Khorasgani نسیم قضاوی خوراسگانی No Royan Institute, Institute for Biotechnology of Academic Center for Education, Culture and Research, Reproductive Biomedicine Research Center, Department of Reproductive Biotechnology, Isfahan, Iran. Department of Biology, Faculty of Sciences, Nour Danesh Institute of Higher Education, Meymeh, Isfahan, Iran. پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست فناوری جهاد دانشگاهی، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، گروه زیست فناوری تولیدمثل، اصفهان، ایران. گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم، موسسه آموزش عالی نور دانش، میمه، اصفهان، ایران. Elham Janghorban-Laricheh الهام جانقربان لاریچه No Royan Institute, Institute for Biotechnology of Academic Center for Education, Culture and Research, Reproductive Biomedicine Research Center, Department of Reproductive Biotechnology, Isfahan, Iran. Department of Biology, Faculty of Sciences, Nour Danesh Institute of Higher Education, Meymeh, Isfahan, Iran. پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست فناوری جهاد دانشگاهی، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، گروه زیست فناوری تولیدمثل، اصفهان، ایران. گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم، موسسه آموزش عالی نور دانش، میمه، اصفهان، ایران. Marziyeh Tavalaee مرضیه تولائی Tavalaee.m@royaninstitute.org Yes Royan Institute, Institute for Biotechnology of Academic Center for Education, Culture and Research, Reproductive Biomedicine Research Center, Department of Reproductive Biotechnology, Isfahan, Iran. پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست فناوری جهاد دانشگاهی، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، گروه زیست فناوری تولیدمثل، اصفهان، ایران. Dina Zohrabi دینا ظهرابی No Department of Biology, Faculty of Sciences, Nour Danesh Institute of Higher Education, Meymeh, Isfahan, Iran. گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم، موسسه آموزش عالی نور دانش، میمه، اصفهان، ایران. Homayon Abbasi همایون عباسی No Isfahan Fertility and Infertility Center, Isfahan, Iran. مرکز باروری و ناباروری اصفهان، اصفهان، ایران. Mohammad Hossein Nasr- Esfahani محمد حسین نصراصفهانی No Royan Institute, Institute for Biotechnology of Academic Center for Education, Culture and Research, Reproductive Biomedicine Research Center, Department of Reproductive Biotechnology, Isfahan, Iran. Isfahan Fertility and Infertility Center, Isfahan, Iran. پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست فناوری جهاد دانشگاهی، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، گروه زیست فناوری تولیدمثل، اصفهان، ایران. مرکز باروری و ناباروری اصفهان، اصفهان، ایران.