fa بررسی میزان بیان ژن DAPK در لنفوسیت‌های خون محیطی بیماران مبتلا به سرطان پستان مقاله اصیل Original Article <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:yekanyw;"><strong><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">از مشکلات اصلی سرطان وجود عدم تعادل مابین رشد سلولی و مرگ سلولی می‌باشد که به‌دلیل تغییر در میزان بیان ژن‌های مربوط به این مکانیسم‌ها است. از جمله ژن‌های دخیل در این امر می‌توان به ژن </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Death-associated protein kinase (DAPK)</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> اشاره نمود. مطالعات نشان داده است که بیان ژن‌ها تحت تاثیر متیلاسیون نواحی پروموتری قرار می‌گیرد. هدف از این مطالعه، بررسی میزان بیان ژن مذکور و تاثیر متیلاسیون بر میزان بیان این ژن و ارتباط آن با ایجاد سرطان پستان در زنان بود.</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">روش بررسی: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">در این مطالعه مورد-شاهدی، ۸۰ بیمار مبتلا به سرطان پستان و ۸۰ نفر به‌عنوان گروه کنترل شرکت داشتند که از شهریورماه ۱۳۹۳ تا اسفند ۱۳۹۵ به بیمارستان‌های شهید فقیهی و نمازی شیراز مراجعه کرده بودند. این مطالعه در مرکز تحقیقات ژنتیک دانشگاه آزاد اسلامی واحد کازرون انجام گردید. از لنفوسیت‌های خون محیطی افراد مورد مطالعه، جهت استخراج </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">mRNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> و ساختن </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">cDNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> و جداسازی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> استفاده شد و جهت تعیین میزان بیان ژن و متیلاسیون به‌ترتیب از روش </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Real-time PCR</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Methylation-specific (MS)-PCR</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> استفاده شد.</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها:</span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">میزان بیان ژن </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">DAPK</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> در بیماران و افراد سالم تفاوت معناداری را نشان داد به این صورت که بیان آن در بیماران نسبت به گروه کنترل کاهش معناداری داشت (۰/۰۱۵۶</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">P=</span></span><span style="font-size:10.0pt;">). از طرفی ارتباط معناداری میان بیان ژن یاد شده و متیلاسیون پروموتر ژن وجود نداشت (۰/۱۳</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">P=</span></span><span style="font-size:10.0pt;">).</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">این پژوهش نشان می‌دهد که، کاهش میزان بیان ژن </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">DAPK</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> در ابتلای افراد به سرطان پستان، نقش موثری را ایفا می‌نماید.&nbsp;&nbsp;</span></span></div> <div></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background</strong>: The main causes and difficulties of cancer are the imbalance between cell growth and cell death. This event is the results of changes in the expression level of genes related to these mechanisms. Among genes including in this case, death-associated protein kinase (DAPK) can be mentioned. Studies have shown that the expression of genes is influenced by the methylation of promoter regions. The purpose of this research was to evaluate the expression of the mentioned gene and the effect of methylation on the expression of this gene and its relationship with developing breast cancer in women.<br> <strong>Methods</strong>: Eighty patients with breast cancer and 80 healthy individuals participated in this case-control study which has been referred to Shahid Faghihi and Namazi hospitals, Shiraz city, from August 2014 to March 2017. This study was carried out at the Genetic Research Center of Islamic Azad University, Kazerun Branch, Iran. Peripheral blood lymphocytes were lysed and the mRNAs were extracted using the InViSorb&trade; RNA preparation kit II (Cat#1062100300, Invitek GmbH, Berlin, Germany) and cleaned up with Qiagen RNeasy spin columns. The first-strand cDNA was synthesized affording to the high capacity cDNA reverse transcription kit procedure. For DAPK gene expression, (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) PCR technique combines the quantitative performance of SYBR&reg; Green-based real-time PCR, used. This technique is gainful, easy-to-use, and emphases only on the genes that you want. We designated 18S-rRNA gene, as our house-keeping gene. For determine of methylation, methylation-specific polymerase chain reaction (MS-PCR) method was used.&nbsp;<br> <strong>Results</strong>: The achieved results from this research show that the levels of DAPK gene expression have a significant difference. The rate of expression in patients was significantly reduced compared with the control group (P=0.0156). Also, the relationship between expression of DAPK factor and lymph node involvement was investigated. The results show the relationship between the factors studied. On the other hand, there was no significant relationship between the expression level of this gene and its promoter methylation (P=0.13).<br> <strong>Conclusion</strong>: This research shows that reduction in the rate of DAPK gene expression plays an effective role in the patients with breast cancer.</div> <div></div> سرطان پستان, پروتیین کیناز همراهی کننده مرگ, بیان ژن, متیلاسیون breast cancer, death-associated protein kinases, gene expression, methylation 875 880 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3666-16&slc_lang=fa&sid=1 Sirous Naeimi سیروس نعیمی naeimis@kau.ac.ir Yes Department of Genetics, Colleague of Sciences, Kazerun Branch, Islamic Azad University, Kazerun, Iran. گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، واحد کازرون، دانشگاه آزاد اسلامی، کازرون، ایران.