Tehran University Medical Journal

other تاثیر سرکوب microRNA-1266-5p بر افزایش بقای سلولی و تغییرات چرخه سلولی در سرطان معده Effect of miRNA-1266-5p repression on the increasing cell survival and alterations of the cell cycle in AGS cell line مقاله اصیل Original Article <div style="text-align: justify;">زمینه و هدف: سرطان معده به‌عنوان شایعترین بدخیمی در نقاط خاصی از جهان نظیر شمال غرب ایران می‌باشد. miRNA ها، RNA‌های غیر کدکننده کوچک و تک رشته‌ای با حدود ۲۳-۱۹ نوکلئوتید می‌باشند. هدف این مطالعه بررسی تاثیر سرکوب microRNA-1266-5p بر بقای سلولی و تغییرات چرخه سلولی در سرطان معده (رده سلولی AGS) بود. روش بررسی: این مطالعه تجربی-پژوهشی از فروردین تا آذر ۱۳۹۶ در مرکز تحقیقات سلولی- ملکولی دانشگاه علوم پزشکی اردبیل انجام گرفت. رده سلولی AGS در محیط کشت RPMI- 1640حاوی ۱۰% سرم و ۱% آنتی‌بیوتیک کشت داده شد. سلول‌ها توسط miR-1266-5p mimic، miR-1266-5p inhibitor و HiPerFect reagent به تنهایی به‌عنوان کنترل منفی، تیمار شدند. میزان بیان miR-1266-5p در سلول‌های کنترل و تیمار شده با تکنیک TaqMan qRT-PCR اندازه‌گیری شد. بقای سلولی و تغییرات چرخه سلولی به‌ترتیب توسط تکنیک MTT و فلوسایتومتری بررسی گردیدند. یافته‌ها: میزان بیان miR-1266-5p در سلول‌های تیمار شده با Mimic به‌طور چشمگیری افزایش و در سلول‌های تیمار شده با Inhibitor کاهش می‌یابد (۰=P). افزایش بیان miR-1266-5p باعث کاهش بقای سلول‌های AGS می‌شود، درحالی‌که کاهش بیان آن بقای سلول‌ها را افزایش می‌دهد (۰=P). همچنین افزایش بیان miR-1266-5p باعث افزایش لول‌ها در فاز G۱ و کاهش سلول‌ها در فاز S می‌شود (۰=P). با این‌حال کاهش بیان miR-1266-5p باعث افزایش جزیی سلول‌ها در فاز G2/M می‌شود (۰/۰۰۱=P). نتیجه‌گیری: miR-1266-5p می‌تواند بقای سلولی را کاهش دهد و چرخه سلولی را متوقف کند و به‌عنوان سرکوب کننده تومور در سلول‌های AGS عمل کند، درحالی‌که مهار آن بقای سلولی را افزایش و آپوپتوز را کاهش می‌دهد.</div> <div style="text-align: justify;">Background: Gastric cancer is among the most common malignancies in certain parts of the world, such as northwest Iran. miRNAs are small and single-stranded noncoding RNAs with about 19-23 nucleotides. Several studies have shown that miRNAs play important roles in gastric tumorigenesis. The aim of this study was to determine the effect of miRNA-1266-5p repression on the cell survival and alterations of the cell cycle in gastric cancer cell line of AGS (NCBI Code: C131, Gastric epithelial cell line). Methods: This experimental study was performed from April to December 2017 in Cellular-Molecular Research Center of Ardabil University of Medical Sciences, Iran. In this study, AGS cells were cultured in RPMI-1640 medium containing 10% serum and 1% antibiotic. The cells were transfected with miR-1266-5p mimic, miR-1266-5p inhibitor and HiPerFect reagent alone as negative control. The miR-1266-5p expression and transfection efficiency were analyzed by Stem-loop TaqMan qRT-PCR. The cell proliferation and cell cycle alterations were determined using MTT calorimetric assay and flow cytometry, respectively. The results were analyzed using SPSS 19.0 statistics software (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) and presented as the means±standard deviation (SD). Results: miR-1266-5p expression was increased in AGS cells transfected with miR-1266-5p mimic compared to control cells (P=0), while miR-1266-5p expression was decreased in transfected cells with the inhibitor compared to controls (P=0). Among different time points, the most effects of miR-1266-5p mimic and inhibitor were noticed after 48 hours of transfection. The upregulated miR-1266-5p significantly decreased cell growth, in contrast, inhibitor promoted cell proliferation (P=0). In addition, miR-1266-5p upregulation induced cell cycle arrest at the transition of G1 to S phase and led to G0/G1 entry (P=0), while of miR-1266-5p led to G2/M entry (P=0.001). Conclusion: According to the results obtained from this study, miR-1266-5p can reduce cell survival and induce cell cycle arrest and act as a tumor suppressor in AGS cells. While its inhibition can increase cell survival and reduce apoptosis.</div> چرخه سلولی, بقای سلول, سرطان معده, میکروآرنا 1266 cell cycle, cell survival, gastric cancer, miRNA-1266 562 567 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3460-2&slc_lang=other&sid=1 Saba Sorayyayi صبا ثریایی No Department of Clinical Biochemistry, Student Research Committee, Ardabil University of Medical Sciences, Ardabil, Iran. گروه بیوشیمی بالینی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، اردبیل، ایران. Sogand Vahidi سوگند وحیدی No Department of Clinical Biochemistry, Student Research Committee, Ardabil University of Medical Sciences, Ardabil, Iran. گروه بیوشیمی بالینی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، اردبیل، ایران. Mohammad Mohammadzadeh محمد محمدزاده No Department of Hematology, Embryology and Stem Cell Research Center, Ardabil University of Medical Sciences, Ardabil, Iran. گروه هماتولوژی، مرکز تحقیقات جنین‌شناسی و سلول‌های بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، اردبیل، ایران. Sayyed Saied Hosseini-Asl سید سعید حسینی-‌اصل saied.hosseiniasl@gmail.com Yes Department of Medical Genetics, Digestive Diseases Research Center, Ardabil University of Medical Sciences, Ardabil, Iran. گروه ژنتیک پزشکی، مرکز تحقیقات بیماری‌های گوارشی، دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، اردبیل، ایران.