other تنوع ژنتیکی ژن استافیلوکوآگولاز ایزوله‌های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی‌سیلین جدا شده از عفونت‌های ادراری و خون مقاله اصیل Original Article <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:yekanyw;"><strong><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></strong><span style="font-size:10.0pt;"> استافیلوکوکوس اورئوس از عوامل بیماری‌زای متداول در انسان است که طیف گسترده‌ای از بیماری‌ها را ایجاد می‌کند. آنزیم کوآگولاز از عوامل مهم بیماری‌زای این باکتری می‌باشد. همچنین بررسی تنوع ژنتیکی ژن کدکننده این آنزیم </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">(Coa)</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> یکی از روش‌های مولکولی تعیین تیپ ایزوله‌های استافیلوکوکوس اورئوس می‌باشد.</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;"></span></span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">روش بررسی: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">در این مطالعه مقطعی، از اسفند ۱۳۹۶ تا مهر ۱۳۹۷، ۱۵۰ نمونه استافیلوکوس اورئوس جدا شده از نمونه‌های ادرار و خون از بیمارستان‌های آموزشی الزهرا و امام حسین (ع) دانشگاه علوم پزشکی اصفهان مورد مطالعه قرار گرفتند. پس از تایید نوع باکتری نمونه با قطعه ژنومی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Coa</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، برای تعیین تیپ کوآگولاز منطقه بسیار متغیر ژن این آنزیم در واکنش </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Polymerase chain reaction (PCR)</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> تکثیر و سپس مورد هضم آنزیمی با استفاده از آنزیم اندونوکلئاز محدودگر </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">AluI</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> قرار گرفت و تنوع طول قطعات هضم آنزیمی مورد بررسی قرار گرفت.</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها:</span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">از ۱۵۰ نمونه ۴۵ نمونه استافیلوکوکوس اورئوس با تست‌های بیوشیمیایی تایید و از این تعداد ۳۶ (۸۰%) نمونه‌ها حامل ژن کوآگولاز بودند. در بین الگوهای </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">PCR</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، الگوی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">bp680</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> در ۲۰ نمونه و الگوی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">bp750</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> در ۱۶ نمونه به‌دست آمدند. پس از هضم آنزیمی برای آزمون </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Restriction fragment length polymorphism (RFLP)</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، چهار الگو به‌دست آمدند که الگوی ۲۸۰+۴۰۰ در ۱۶ نمونه (۴۴/۴%)، الگوی ۲۸۰+۴۷۰ در ۷ نمونه (۱۹/۴%)، الگوی ۳۴۰+۳۴۰ در ۶ نمونه (۱۶/۶%)، الگوی بدون هضم ۷۵۰ در ۷ نمونه (۱۹/۶%) می‌باشند.</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">با استفاده از آزمایشات صورت گرفته مشخص گردید که الگوی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">PCR-RFLP</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، ۲۸۰+۴۰۰ جفت بازی الگوی غالب در نمونه‌های استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده در اصفهان می‌باشد.</span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background</strong>: Staphylococcus aureus is a common pathogen in human that can be the cause of a wide range of infectious diseases including bacteremia, pneumonia, cellulitis, and osteomyelitis and skin and soft tissue infections. The coagulase enzyme is one of the most important virulence factors of this bacterium. The polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) Coa pattern is one of the molecular base typing methods. Molecular typing plays an important role in epidemiological studies of nosocomial infection, such as methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infection. The PCR-RFLP Coa gene technique provides a useful preliminary method to monitor variations in MRSA populations. We were done Coa-RFLP typing according to the method of Hookey et al., with some modifications.<br> <strong>Methods</strong>: In this cross-sectional study, one-hundred fifty isolates of S. aureus from urine and blood samples of patients that collected from educational hospitals of Imam Hossein and Al Zahra Isfahan University of Medical Sciences, Iran, from February 2018 to October 2018 were analyzed. After bacterial confirmation of isolates by Coa gene in polymerase chain reaction (PCR) technique, to perform coagulase gene typing, the repeated units encoding hypervariable regions of the coagulase gene of S. aureus were amplified by PCR. This was followed by AluI restriction enzyme digestion and analysis of restriction fragment length polymorphism (RFLP) patterns.<br> <strong>Results</strong>: Of 150 samples, 45 isolated of S. aureus were confirmed by biochemical methods. Of previous positive samples, 36 (80%) isolates carried Coa gene. Two different genotypes of Coa gene were obtained that include bp680 fragment in 20 specimens and bp750 fragment in 16 specimens. After enzymatic digestion by AluI restriction enzyme for RFLP, four different restriction patterns were obtained that including, the 280+400 pattern in 16 specimens (44.4%), 280+470 pattern in 7 specimens (19.4%), 340+340 pattern in 6 specimens (16.6%) and 750 patterns without digestion were in 7 specimens (19.6%).<br> <strong>Conclusion</strong>: Using the present experiments, it was determined that the PCR-RFLP pattern, 280+400, was the dominant pattern in the Staphylococcus aureus samples isolated in Isfahan.</div> کواگولاز, پژوهش‌های مقطعی, ژنوتیپ, واکنش زنجیره‌ای پلیمراز, استافیلوکوکوس اورئوس coagulase, cross-sectional studies, genotype, polymerase chain reaction, staphylococcus aureus 208 215 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4446-4&slc_lang=other&sid=1 Mehrdad Mohammadi مهرداد محمدی mehrdad.mohammadi1984@gmail.com Yes Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran. گروه میکروب و ویروس‌شناسی، دانشکده‌ پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران. Jamshid Faghri جمشید فقری No Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran. گروه میکروب و ویروس‌شناسی، دانشکده‌ پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.