1388/1/12، جلد ۶۷، شماره ۱، صفحات ۲۵-۳۲

عنوان فارسی جداسازی Anti-dsDNA IgG به‌وسيله تست الايزا غير مستقيم از دو منبع مختلف ds-DNA؛ اشريشيا کلی و تيموس گوساله
چکیده فارسی مقاله

زمينه و هدف: آنتی‌بادی‌های عليه dsDNA به‌صورت فراوان در سرم بيماران لوپوس اريتماتوس سيستميک وجود دارد امروزه کيت‌های تجاری الايزا از DNAها و اتصال‌گرهای مختلف DNA برای جداسازی آنها استفاده می‌کنند. اين مطالعه به‌منظور ارزيابی دو منبع مختلف DNA و نيز دو نوع ماده اتصال‌گر مختلف DNA در سنجش الايزا صورت گرفت.

روش بررسی: در اين مطالعه DNA اشريشيا کلی (25922ATCC) و تيموس گوساله را با درجه خلوص بالا استخراج گرديد و به‌عنوان آنتی‌ژن جهت کوتينگ و از دو ماده پلی-ال-ليزين و Methylated- BSA جهت پيش کوتينگ مورد استفاده و ارزيابی قرار گرفتند. جهت تعيين حساسيت و ويژگی از نمونه‌های سرمی از بيماران لوپوس اريتماتوس سيستميک و افراد سالم اهدا کننده خون در مقايسه با تست ايمنوفلورسانس (IF) و کيت تجاری استفاده گرديد با استفاده از نرم‌افزار SPSS ويراست 15 و آزمون McNemar به‌منظور تجزيه و تحليل داده‌ها استفاده گرديد.

يافته‌ها: نتايج نشان داد که Methylated- BSA واکنش غير اختصاصی بسيار کمتری نسبت به پلی-ال-ليزين دارد همچنين حساسيت و ويژگی الايزا با DNA تيموس گوساله در مقايسه با تست ايمنوفلورسنس (IF) و کيت تجاری الايزا به‌ترتيب 80%، 88% و 100%، 98% به‌دست آمد و الايزا با DNA اشريشيا کلی در مقايسه با تست ايمنوفلورسنس (IF) و کيت تجاری الايزا به‌ترتيب 73%، 69%، 85% و 79% به‌دست آمد.

نتيجه‌گيری: DNA تيموس گوساله بالقوه منبع آنتی‌ژن مفيدی جهت جداسازی آنتی‌بادی‌های عليه dsDNA توسط آزمون الايزا است. همچنين استفاده از Methylated- BSA می‌تواند نقش موثری در کاهش واکنش‌های غيراختصاصی نسبت به پلی- ال- ليزين داشته باشد.

کلیدواژه‌های فارسی مقاله لوپوس اریتماتوس سیستمیک،آنتی‌بادی‌های علیه DNA،الایزا

عنوان انگلیسی Detection of anti-dsDNA by IgG ELISA test using two different sources of antigens: calf thymus versus E.coli
چکیده انگلیسی مقاله

Background: Anti-dsDNA antibodies frequently found in the sera Systemic Lupus Erythematosus patients, particularly in active disease stage. Nowadays exploit different eukaryotic and prokaryotic dsDNA as antigen source and different reagents as binder. The aim of this study to compared two dsDNA different sources and tow different kinds of reagents for binder in ELISA test.

Methods: In this study bacterial genomic DNA from E.coli (ATCC 25922) and genomic DNA from calf thymus extracted with high purity and were used as antigens for IgG anti-dsDNA detection by ELISA. To coat dsDNA in microtiter wells, tow different kinds of reagents including methylated -BSA and poly-l-lysine (for pre-coating) are used. Sera from systemic lupus erythematosus patients and from normal blood donors are used to assess sensitivity and specificity of our ELISA test in compared with IF test and commercial kits.

Results: Our results displayed pre-coating of microtiter plates with methylated -BSA reduce nonspecific binding reaction and the relative sensitivity and specificity of ELISA increased when calf thymus DNA is employed as antigenic source in compared with IF test and commercial kits 80%, 88% and 100%, 98% respectively, but when E.coli DNA is used 73%, 69% and 85%, 79%, respectively.

Conclusion: The genomic DNA from calf thymus is a potentially useful source of antigen for detection of anti-dsDNA by ELISA. Also the use of methylatted- BSA could have an effective role in reducing of nonspecific binding reactions.

کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Systemic lupus erythematosus,anti-DNA antibodies,ELISA

نویسندگان مقاله 19034---19035---19036---19037---19038---19039---19040---

نشانی اینترنتی http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-491&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده General
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات