|
|
1387/4/11، جلد ۶۶، شماره ۴، صفحات ۲۲۹-۲۳۶
|
|
|
| عنوان فارسی |
جداسازی سلولهای بنيادی مزانشيمی از مغز استخوان موش با تعويض مداوم محيط کشت |
|
| چکیده فارسی مقاله |
زمينه و هدف: از ويژگیهای منحصر بهفرد سلولهای بنيادی مزانشيمی که از آن در جداسازی استفاده شده است توانايی چسبيدن به پلاستيک است. بهکارگيری اين ويژگی در جداسازی سلولهای بنيادی مزانشيمی گونههای مختلف پستانداران بهجز موش با موفقيت همراه بوده است. در مطالعه حاضر با بهينهسازی روش چسبيدن به سطح ظرف پلاستيکی، جمعيت هموژن سلولهای بنيادی مزانشيمی از مغز استخوان موش جداسازی شد. اساس اين روش بر تعويض مداوم محيط کشت بلافاصله پس از کشت سلولهای مغز استخوان است.
روش بررسی: موشهای نژاد Balb/c کشته شدند و مغز استخوان از فمور و تيبيا خارج و در ظرف شش خانهای کشت گرديد. سه ساعت پس از آغاز کشت محيط کشت رويی دور ريخته شد و محيط جديد اضافه گرديد. تعويض محيط کشت در هر هشت ساعت و در فاصله زمانی 72 ساعت ادامه داشت. اين کشت تا زمان پرشدن نسبی ظرف توسط سلولهای فيبروبلاستی نگهداری شد و پس از آن پاساژ اول انجام گرفت. اين سلولها برای مطالعات بيشتر مورد بررسی قرار گرفتند. بهمنظور اثبات ماهيت مزانشيمی، سلولها به دودمانهای مزانشيمی تمايز داده شدند. در ضمن سلول مورد نظر از نظر کلونوژنيک بودن و آنتیژنهای سطح سلول مورد ارزيابی قرار گرفتند.
يافتهها: در اين مطالعه دو هفته پس از کشت اوليه، جمعيت خالص از سلولهای شبه فيبروبلاستی بهدست آمد. اين سلولها که در آنها مارکرهای سطحی CD90, Sca-l, CD44 بيان داشت، به آسانی به استخوان و چربی تمايز يافتند.
|
|
| کلیدواژههای فارسی مقاله |
موش،مغز استخوان،سلولهای بنیادی مزانشیمی،جداسازی |
|
| عنوان انگلیسی |
Isolation of mesenchymal stem cells from mouse bone marrow: frequent medium change method |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Background: MSCs have been isolated from a variety of mammals by the plastic adherence method. However, this method can be problematic due to the unwanted growth of hematopoietic cells and non-MSCs. The potential of MSCs to differentiate along multiple lineages is the key to the identification of stem cell populations in the absence of molecular markers. In the present study, we describe a homogeneous population of MSCs from mouse bone marrow isolated using an improved plastic adherence method that employs frequent medium change (FMC) at the initial hours of harvested bone marrow cell culture.
Methods: Balb/c mice were sacrificed and whole bone marrow cells were aspirated from the femur and tibia and then cultivated in six-well plates. After 3-4 hours of culture, old medium was removed and fresh medium was added. FMC was performed every eight hours over a 72 hour period. When primary cultures became nearly confluent, the first passage was performed. These cells were then used for further examination. To investigate their mesenchymal nature, the cells were allowed to differentiate into mesenchymal lineages and examined at each passage up to the tenth passage for surface antigens by flow cytometry.
Results: We achieved purified populations of fibroblast-like cells in the two weeks after culture initiation. The cells were capable of differentiating into osteocytes and adipocytes. Isolated MSCs were reactive to the CD44, Sca-1, and CD90 cell surface markers. MSCs were negative for hematopoietic surface markers such as CD34, CD11b, CD45, CD31, CD106, CD117 and CD135.
Conclusions: This protocol provides an efficient isolation of homogeneous populations of MSCs from mouse bone marrow. |
|
| کلیدواژههای انگلیسی مقاله |
Murine, bone marrow, mesenchymal stem cells, isolation |
|
| نویسندگان مقاله |
22212---22213---22214--- |
|
| نشانی اینترنتی |
http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-605&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
General |
| نوع مقاله منتشر شده |
|
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|
