1380/5/10، جلد ۵۹، شماره ۴، صفحات ۱-۱۰
عنوان فارسی راه اندازی و استاندارد کردن روش ELISA در تشخيص عفونت هليکوباکترپيلوری
چکیده فارسی مقاله

آلودگی با هليکوباکترپيلوری از مهمترين عوامل ايجاد کننده بيماريهای دستگاه گوارش فوقانی در سراسر دنيا می باشد و اخيرا شواهدی مبنی بر دخالت مستقيم و يا غيرمستقيم اين باکتری در ايجاد بيماريهای خارج از دستگاه گوارش نيز بدست آمده، بنابراين روشهای تشخيصی آسان و سريع و غيرتهاجمی و قابل اعتماد که نياز به انجام عمل آندوسکوپی ندارند، در تشخيص اين عفونت چه در بيماران مبتلا به ناراحتی های گوارشی و چه در ساير بيماران با مطالعات سرواپيدميولوژی ميتواند بسيار کمک کننده باشد. از بين اين روشها، آزمون ELISA بيش از ساير روشها مورد توجه قرار گرفته است. در اين پژوهش، روش ELISA به منظور اندازه گيری IgG اختصاصی ضد هليکوباکترپيلوری در داخل کشور راه اندازی و استاندارد شده است. برای راه اندازی و استاندارد کردن روش ELISA 9 سويه هليکوباکترپيلوری جدا شده از بيماران را انتخاب و پس از خرد کردن آن با امواج صوتی (Sonication) آنتی ژن خام محلول تهيه و با کمک روش شطرنجی بهترين غلظت آنتی ژن و بهترين تيتر کونژوگه تعيين شد و سپس با استفاده از 52 نمونه سرم از افراديکه آلودگی يا عدم آلودگی آنها با روشهای مرجع (gold standard) شامل کشت از بيوپسی، اوره آز سريع و بررسی لام مستقيم اثبات شده بود و با استفاده از منحنی های Roc، تيتر مناسب سرم و مرز تشخيصی (cut-off) تعيين شد. ضمنا نمونه های فوق با استفاده از يک کيت تجارتی نيز مورد آزمايش قرار گرفت و نتايج با يکديگر مقايسه شدند. حساسيت و ويژگی در روش ELISA استاندارد شده در آزمايشگاه به ترتيب 93/2% و 95/4% و در روش ELISA تجارتی 87/8% و 73% بدست آمد. در مجموع با توجه به حساسيت و ويژگی قابل قبول، سهولت کار، مقرون به صرفه بودن و غيرتهاجمی بودن اين روش، ميتوان از آن در تشخيص عفونت هليکوباکترپيلوری و همچنين مطالعات اپيدميولوژی استفاده کرد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Standardization and in-house ELISA setup for helicobacter pylori serologic diagnosis
چکیده انگلیسی مقاله Helicobacter pylori (H.pylori) is the most prominent causative agent of gastroduodenal diseases all over the world. Other manifestations such as urticaria and coronary heart diseases, also are suspected to be induced by H.pylori. Non invasive methods are preferred for diagnosis; and ELISA, because of its reliability, speed, sensitivity and specificity is widely preferred as diagnostic tool. Previously we have used IFA, and here, we report an indirect ELISA technique for H.pylori diagnosis. First, 9 strains, of H.pylori isolated from biopsies, were cultured, and the soluble crude antigen was used to coat ELISA plates. Antigen concentration and conjugated antiserum dilution were optimised using checker board method. In this study the gold standard was: rapid urease test, culture and direct smear. Patient serum dillution and the cut-off value was determind, using 22 negative and 30 positive confirmed samples according to ROC curve and the results were compared with a commercial kit. The sensitivity and specificity of this method were 93.2 percent and 95.4 percent respectively. A commercial ELISA Kit, was used and compared simultaneously. The sensitivity and specificity were 87.8 percent and 73 percent respectively. Therefore, regarding the acceptable sensitivity and specificity, ease of work of ELISA, being economical and non-invasive, it can be employed in diagnosis of H.pylori infection and also in epidemiological studies.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Serologic diagnosis
نویسندگان مقاله 27176---27177---27178---27179---27180---27181---
نشانی اینترنتی http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-1303&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده General
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات