زمینه و هدف: ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) یکی از شایعترین ویروسهایی است که در ایجاد سرطان دهانه رحم نقش دارد و پژوهشها نشان داده است که در بیشتر موارد سرطان دهانه رحم، پروتیینهای E۶ و E۷ ویروس پاپیلوما وجود دارد. هدف از مطالعه کنونی بهینهسازی بیان سازه پلیتوپیک حاوی ژنهای E۶ و E۷ ژنوتیپهای مختلف ویروس پاپیلومای انسانی بهعنوان کاندیدای واکسن بود.
روش بررسی: این مطالعه تجربی از مهر ۱۳۹۲ تا شهریور ۱۳۹۳ در بخش ویروسشناسی انستیتوپاستور ایران انجام شد. ابتدا نواحی ایمنیزای پروتیینهای E۶ و E۷ در ژنوتیپهای مختلف پاپیلوما ویروس انسانی (HPV۱۶, ۱۸, ۳۱, ۴۵) بهصورت بیوانفورماتیک مورد بررسی قرار گرفتند. سازه بیانی سنتتیک کدکننده پروتیینهای E۶ و E۷ در اشرشیاکلی ترانسفورم شده و سپس بیان پروتیین مربوطه انجام گرفت و بهمنظور بهینهسازی بیان پروتیین نوترکیب مورد نظر، دانسیته سلولی، مدت زمان انکوباسیون، دمای رشد، غلظتهای مختلف isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG) و محیطهای کشت مختلف مورد استفاده قرار گرفت.
یافتهها: پس از بهینهسازی بیان، بهترین بیان پروتیین نوترکیب مورد نظر در محیط کشتSuper Optimal Broth (SOB) (Merck, Germany) بهدست آمد. در این محیط کشت، بیشترین میزان بیان در ۸/۰(Optical density) OD۶۰۰=، غلظت mM ۱/۰ از IPTG، زمان انکوباسیون یک ساعت در دمای °C ۳۷ در میزان بیانی BL۲۱ (A۱) اشرشیاکلی بهدست آمد.
نتیجهگیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که بیان پروتیینهای E۶ و E۷ ژنوتیپهای مختلف ویروس پاپیلومای انسانی قابل انجام بوده و در نهایت میتوان از آن بهعنوان یک کاندیدای واکسن علیه ویروس استفاده نمود.