محمدرضا قرائتی، منوچهر میرشاهی، مجید صادقی‌زاده،
دوره 66، شماره 10 - ( 10-1387 )
چکیده
زمینه و هدف: سلولهای سرطانی برای رشد و تقسیم به غذا نیازمندند. بنابراین برای درمان سرطان یکی از روشهای مهم و امیدوار کننده استفاده از مهارکنندههای رگزایی است که رشد تومور و متاستاز سلولهای سرطانی را متوقف میکنند. مطالعات قبلی نشان میدهد که Plasminogen related protein-B دارای اثرات ضد توموری است. با توجه به شباهت این پپتید با Preactivation peptide پلاسمینوژن (PAP)، اثرات ضد رگزاییPAP در مدلی آزمایشگاهی مورد مطالعه قرار گرفت.
روش بررسی: قطعه DNA بیان‌کننده PAP به کمک PCR از ژن پلاسمینوژن انسانی در حامل pGEX-2T همسانه‌سازی شد و در باکتری Escherichia coli به صورت متصل با GST (Glutathione S-transferase) بیان گردید، سپسRefolding پروتئین حاصل (GST-PAP) انجام گرفت و پروتئین مذکور با رزینGSH-Sepharose تخلیص شد و روی یک مدل رگزایی با استفاده از ماتریژل بررسی گردید.
یافته ها: پس از تایید صحت پروتئین خالص شده با روشهای
SDS-PAGE و ایمنوبلاتینگ، بر اساس نتایج حاصل از سنجش رگزایی در سیستم ماتریژل مشخص شد که GST-PAP رگزایی را متوقف و مهار میکند. طبق این اطلاعات همبستگی بسیاری بین غلظت اعمال شده از GST-PAP و مهار رگزایی وجود دارد که به صورت کاهش طول ساختارهای مویرگی شکل و تعداد توبولها مشخص میشود. مهار رگزایی در غلظت‌های بالای 25 میکروگرم در میلی‌لیتر نسبت به کنترل معنیدار هستند.
نتیجه‌گیری: براساس یافته‌های این مطالعه
GST-PAP در سیستم ماتریژل توانایی مهار تشکیل شبکه سلولهای آندوتلیال را داراست. این نتایج میتواند تاییدی برای فرضیه مهار رگزایی توسط PAP باشد. لذا این پپتید میتواند نامزدی برای مهار رگزایی محسوب شود.
